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HyClone胎牛血清培養平滑肌細胞的兩種方法 HyClone胎牛血清培養血管平滑肌細胞常用的方法有貼塊法(explant)和酶解離法(enzymedisperse)。下面一起來看下這兩種方法。1、貼塊法方法：動物經頸動脈放血后，在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段，置于含Hank's液的平皿中漂洗3次，將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層，然后縱行切開血管，刮除內膜即內皮細胞迅速撕下中膜內、中層，切成約1mm寬的小條，浸泡在含血清的Hank's液中，并將撕下小組織塊種植于培養瓶壁。置于37℃恒溫箱，2h左右，取出培養瓶加入20... 查看詳情 2015-01-06
纖維素酶的性質及作用機理詳解纖維素酶分子的大小因來源不同而不盡相同，三大類酶分子量一般在23Kda～146Kda之間。多數真菌和少數細菌的纖維素酶都受糖基化，糖基與蛋白之間以共價鍵結合，或呈可解離的絡合狀態。糖基化作用在一定程度上保護酶免受蛋白酶的水解，而纖維素酶正是由于糖基化，使其所含碳水化合物的比率在不同酶之間發生差異，導致酶的多形式和分子量的差別。通過比較分析，人們發現許多不同纖維素酶間表現出一定的同源性，且纖維素酶分子普遍具有類似的結構。由球狀的催化結構域(CD)、連接橋和纖維素結合結構域(CB... 查看詳情 2014-12-20
瓊脂糖凝膠電泳實驗之凝膠制作與點樣一、瓊脂糖凝膠制作1、瓊脂糖凝膠濃度配制凝膠的濃度據實驗需要而變，一般在0．8％～2．0％之間，如果一次配制凝膠100ml，沒用完的凝膠可以再次融化，但隨著融化次數的增加，水分丟失也越多，凝膠濃度則會越來越高，導致實驗結果不穩定，補水辦法：一是在容器上標記煮膠前的刻度，煮膠后補充相應的水分至原刻度；二是在煮膠前稱重，煮膠后補充水至原重量。粗略一點的方法是通過多次較恒定的煮膠條件得出一個經驗補水值。以保證凝膠濃度基本維持在原濃度。核酸染色劑溴化乙錠(ethidiumbromid... 查看詳情 2014-12-10
脂質體2000轉染細胞實驗材料及操作步驟一、脂質體2000轉染細胞實驗材料：1、Vero細胞2、轉染級質粒3、DMEM細胞培養液：無血清DMEM、10%血清DMEM4、脂質體20005、6孔細胞培養板二、脂質體2000轉染細胞實驗操作步驟：（以6孔板為例予以說明）1、細胞鋪板：轉染前一天進行鋪板，第二天待細胞長成單層即可進行轉染。（Vero細胞按一傳三的比例進行傳代，一般10~12h即可。）2、溶液1：240ul無血清DMEM+10ullipofectamine2000perwell（總體積250ul）（溫育5mi... 查看詳情 2014-12-05

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